On trouve le point isoélectrique en faisant la moyenne des $pK_a$ des différents couples formés par un acide aminé:
Démonstration: Puisque l'espèce II est neutre et que I et III ont signes opposés, il faut trouver le pH pour lequel [I] = [III]
(1) $\frac{[H_3O^+][II]}{[I]}=10^{-2,4}$ (2) $\frac{[H_3O^+][III]}{[II]}=10^{-9,6}$ (3) $[III]=[I]$ En multipliant (1) par (2) et en introduisant (3), on trouve : $[H_3O^+]^2= 10^{-12}$, d'où le résultat!
Démonstration: À $pH =2,9$, l'espèce IV possède une concentration négligeable, en effet $\frac{10^{-2,9}[IV]}{[III]}=10^{-9,2}$ On peut donc la négliger et procéder comme pour l'exemple précédent!
Démonstration: À $pH =9,7$, l'espèce I possède une concentration négligeable, en effet $\frac{10^{-9,7}[II]}{[I]}=10^{-2,2}$ On peut donc la négliger et procéder comme pour l'exemple précédent!